電泳過程至關重要,稍有不慎我們就只能對著 「微笑線」和 「皺眉線」 嘆氣,而質量好的電泳能讓目的條帶整齊,結果圖讓人眼前一亮。電泳的支持介質為聚丙烯酰胺凝膠,該凝膠的聚合則由丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺單體在自由基的催化下完成。
細胞爬片是一種將細胞培養在玻璃或塑料表面上,使其附著并擴展的技術。這種技術可以用于觀察細胞形態、細胞運動、細胞-細胞相互作用等。我們在做免疫熒光(IF),激光共聚焦(Confocal),凋亡檢測(TUNEL)時,免不了要制備細胞爬片,爬片質量完全決定了最后拍照的質量以及實驗數據的精準性。
細胞裂解成分一般使用的是表面活性劑,常用的有曲拉通X-100(Triton X-100)、脫氧膽(deoxycholate)、乙基苯基聚乙二醇(Nonidet P40,NP-40)、十二烷基磺酸鈉(SDS)。其中Triton X-100和NP-40為非離子型,deoxycholate和SDS為離子型。不同裂解成分的裂解強度不同,一般來說Triton X-100和SDS的裂解能力較強,deoxycholate和NP-40的裂解效果較為溫和,可以根據不同的實驗需求選用不同的裂解液。
標準品是標記免疫分析定量的依據。標準品的正確與否直接影響樣品的測定結果。如果在連續測定中,或各實驗室之間使用的標準品不一致,則可影響到實驗結果的可比性。為此,對標記免疫分析所使用的標準品應滿足如下要求。