菌種是用于發酵過程中作為活細胞催化劑的微生物,是指食用菌、工業菌、農用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料,其中包括細菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類。菌株是一種菌類系列中一個品種,表示同種微生物不同來源的純種培養,從自然界中分離得到的每一個微生物純培養都可稱一個菌株。
各種單糖和麥芽糖是還原糖,蔗糖和淀粉是非還原糖。利用溶解度不同,可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來,再用酸水解法使沒有還原性的雙糖和多糖徹底水解成有還原性的單糖。在堿性條件下,還原糖將3,5-二硝基水楊酸還原為3-氨基-5-硝基水楊酸(棕紅色物質),還原糖則被氧化成糖酸及其它產物,在一定范圍內,還原糖的量與棕紅色物質深淺的程度呈一定的比例關系,在540nm 波長下測定棕紅色物質的消光值,查對標準曲線并計算,便可分別求出樣品中還原糖和總糖的含量。多糖水解時,在單糖殘基上加了一分子水,因而在計算中須扣除已加入的水量,測定所得的總糖量乘以0.9 即為實際的總糖量。
鉀是人體所必需的一種微量元素,一般水果和蔬菜中都含有大量的鉀。但是由于高鉀對心臟是有抑制作用的,當身體內鉀的含量過高會對身體造成巨大的危害,輕者四肢、嘴角麻木,心率減慢低于60次/分鐘;重者會造成心跳呼吸驟停。因而需要鉀單元素溶液標準物質進行檢測。
天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。
具備緩沖作用的緩沖溶液,通常針對溶液中放入一定量的酸和堿,能夠起到防止溶液PH值產生一定變化的良好作用。一般來說,弱酸以及其鹽溶液混合而成的溶液、弱堿與其鹽溶液進行混合的溶液等,都可以被稱為緩沖溶液。能夠產生對酸的緩沖作用,是由于其中的弱酸根離子的原因。如果向該溶液里面滴加定量的強酸物質,氫離子勢必要被弱酸根離子消耗完。這樣就能維持PH的固定值,使其不會變化。如果加入適量強堿,溶液里的弱酸會消耗氫氧根離子,從而阻礙PH發生改變。
培養細胞至對數生長期,細胞以胰酶消化計數后,用細胞計數測出細胞密度,每孔接種 5×104 個細胞,添加細胞培養液至 500μL。通常情況下,該接種量的 H1299 或 293T 細胞在感染后第 3 天可生長至 80%-90% 融合度。(接種目的細胞時,請根據細胞的實際生長速度調整接種量,使目的細胞感染后第 3 天生長至 80%-90% 融合度)
與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。既可以定性,又可以半定量的Western是初步鑒定蛋白質最方便也是最通用的方法。
細菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易著色,若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽孢呈無色透明狀)。芽孢染色法就是根據芽孢既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設計的。所有的芽孢染色法都基于同一個原則:除了用著色力強的染料外,還需要加熱,以促進芽孢著色。當染芽孢時,菌體也會著色,然后水洗,芽孢染上的顏色難以滲出,而菌體會脫色。然后用對比度強的染料對菌體復染,使菌體和芽孢呈現出不同的顏色,因而能更明顯地襯托出芽孢,便于觀察。