將一般細(xì)菌的菌種純化后接種于普通肉湯管,4~6h增菌后,加入適量甘油一生理鹽水保存液,-20℃冰箱保存;鏈球菌屬和奈瑟氏菌屬的菌株純化后接種于血清肉湯管,在5%~10%CO2中經(jīng)8~10h增菌后,加入適量保存液,80℃低溫冰箱保存;真菌菌種純化后直接取菌洗入肉湯,不做培養(yǎng),加入保存液后,-20℃冰箱保存。結(jié)果在連續(xù)3年實(shí)驗(yàn)期內(nèi),各菌種保存效果良好,且其形態(tài)結(jié)構(gòu)、染色特性、生化反應(yīng)等與標(biāo)準(zhǔn)株相符。結(jié)論使用甘油生理鹽水保存法來保存菌種,各菌種保存時(shí)間長,方法簡便,特別是使鏈球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般實(shí)驗(yàn)室得以保存。
細(xì)胞免疫熒光(Immunofluorescence, IF)是一種常用的技術(shù),用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)或其他分子的分布和表達(dá)情況。分析細(xì)胞免疫熒光的結(jié)果涉及多個(gè)步驟,包括圖像采集、圖像處理、定量分析和數(shù)據(jù)解釋。以下是詳細(xì)的步驟和方法:
彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維,在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4——5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大,容易伸展,在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成,新鮮時(shí)呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng),折光性強(qiáng),含量多時(shí)在HE染片上呈折光性強(qiáng)的粉紅色,量少的不顯色。故量多時(shí)與膠原纖維不易區(qū)別,量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。
培養(yǎng)基按微生物的種類可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基等四類。
蛋白質(zhì)測(cè)定是指通過物理或化學(xué)方法對(duì)蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)是構(gòu)成人體細(xì)胞和組織的重要成分,蛋白質(zhì)測(cè)定是生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中最常用、最基本的分析方法之一。人體正常值一般是 60~80 g/L。
注:所有步驟應(yīng)在無菌無毒的超凈工作臺(tái)進(jìn)行。胰蛋白酶處理時(shí)間不宜過長。
細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽W畛R姷挠懈锾m氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。