免疫學(xué)檢測即根據(jù)抗原、抗體反應(yīng)的原理,利用已知的抗原檢測未知的抗體或利用已知的抗體檢測未知的抗原。由于外源性和內(nèi)源性抗原均可通過不同的抗原遞呈途徑誘導(dǎo)生物機體的免疫應(yīng)答,在生物體內(nèi)產(chǎn)生特異性和非特異性T細(xì)胞的克隆擴增,并分泌特異性的免疫球蛋白(抗體)。由于抗體-抗原的結(jié)合具有特異性和專一性的特點,這種檢測可以定性、定位和定量地檢測某一特異的蛋白(抗原或抗體)。
免疫學(xué)檢測技術(shù)的用途非常廣泛,它們可用于各種疾病的診斷、療效評價及發(fā)病機制的研究。最初的免疫檢測方法是將抗原或抗體的一方或雙方在某種介質(zhì)中進(jìn)行擴散,通過觀察抗原-抗體相遇時產(chǎn)生的沉淀反應(yīng),檢測抗原或抗體,最終達(dá)到診斷的目的。這種擴散可以是蛋白的自然擴散,例如環(huán)狀沉淀試驗、單向免疫擴散試驗、雙向免疫擴散試驗。
(1)單向免疫擴散試驗(single immunodiffusion test):就是在凝膠中混入抗體,制成含有抗體的凝膠板,將抗原加入凝膠板預(yù)先打好的小孔內(nèi),讓抗原從小孔向四周的凝膠自然擴散,當(dāng)一定濃度的抗原和凝膠中的抗體相遇時便能形成免疫復(fù)合物,出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈,沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正比。
(2)雙向免疫擴散試驗(double immunodiffusion test):一種分析鑒定抗原、抗體純度和抗原特異性的試驗。即抗原和抗體分子在凝膠板上擴散,二者相遇并達(dá)到最適比例時形成沉淀線。利用蛋白在不同酸堿度下帶不同電荷的特性,可以利用人為的電場將抗原、抗體擴散。例如:免疫電泳試驗和雙向凝膠電泳。
