培養酵母菌所用的培養基和霉菌所用的培養基是一樣的，它們都屬于真菌。
常用的有PDA培養基、孟加拉紅培養基、高鹽察氏培養基、酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂等等。培養7天后如果菌落長毛的就是霉菌，沒有毛的就是酵母菌，形態可能會不一樣，因為酵母菌不止一種，不同的酵母菌長出來的形態會不一樣。
酵母菌的適宜培養基是米曲培養基，合成培養基有ypd，組成為：葡萄糖2%，蛋白胨1%，酵母膏0.5%。
最簡單的培養基：
一)麥芽汁培養基的配制
1.培養基成分
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2.配制方法
(1)用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時，讓其停止發芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存備用。
(2)取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍色出現，即表示糖化完全)。
(3)糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清，加水20 ml，調勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。
(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調pH至6.4。如當地有啤酒廠，可用未經發酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。
(5)如配固體麥芽汁培養基時，加入2%瓊脂，加熱融化，補充失水。
(6)分裝、加塞、包扎。
(7)高壓蒸汽滅菌100 Pa滅菌20 min。
